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布里渊显微镜技术原理——用“光”测量生物样本的“软硬”

基于布里渊散射原理的光学成像技术,通过检测声子引起的布里渊频移,无需标记、无需接触即可获得样本内部的力学特性信息。
采用近红外激光激发,高光谱分辨率搭配最高探测器灵敏度,实现最快信号捕获。
每个像素都包含局部刚度或粘度信息,可获取三维空间的力学数据立方体。
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布里渊显微镜技术原理——用“光”测量生物样本的“软硬”

在生命科学与材料科学中,力学特性是理解生物体功能和材料性能的关键参数。然而,传统的力学测量手段往往面临着一个两难选择:要么提供高精度但破坏样本(如原子力显微镜的接触式测量),要么保持样本活性但无法获得三维体积信息。布里渊显微镜的出现,为这一困境提供了全新的解决方案。

一、技术原理:从“声子”到“刚度”的物理桥梁

布里渊显微镜是一种基于布里渊散射原理的光学成像技术。当单色光(激光)射入材料内部时,会与材料中天然存在的声子(即量子化的声波)发生相互作用。这种相互作用导致部分入射光发生非弹性散射,其频率会发生微小偏移,这一偏移量被称为“布里渊频移”。

布里渊频移并非一个随机的物理量——它与材料内部的声速直接相关,进而与材料的体积模量(即刚度的基本度量)存在明确的物理对应关系。换言之,通过精确测量布里渊频移,研究人员即可推算出样本局部的力学特性,无需任何物理接触。

二、从实验室自制装置到商用化系统的技术跨越

布里渊显微镜的概念早在上世纪就已提出,但长期以来仅存在于少数物理实验室的自制装置中,无法被生物医学研究者广泛使用。其技术难点主要体现在以下几个方面:

信号极其微弱:布里渊散射信号通常比入射光弱数个数量级,需要使用高精度光谱仪和极高灵敏度的探测器才能有效采集。

光谱分辨率要求极高:布里渊频移通常在GHz量级,对应的波长变化仅为pm级别,需要光谱仪具备极高的分辨率才能准确分辨。

系统稳定性要求苛刻:微小的温度变化或机械振动都可能掩盖真实的布里渊信号,对系统的机械和热稳定性提出了极高要求。

Discoverer™系统的核心突破正是在于解决了上述技术难点。系统采用集成式封闭盒设计,具有最高的机械和热稳定性,有效隔绝环境振动和温度波动对测量的干扰。高光谱分辨率搭配最高探测器灵敏度,实现最快信号捕获,将原本需要数十分钟甚至数小时的采集时间大幅缩短。

三、与共聚焦显微镜类似的成像方式

从技术上讲,布里渊显微镜类似于共聚焦显微镜。激光束通过物镜聚焦到样本内部,逐点扫描后,每个像素点都包含有关局部刚度或粘度的信息。最终,用户可以获得一个充满3D力学特性数据的数据立方体——这是一张真正的“力学CT图像”。

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四、780 nm近红外激光的优势

Discoverer™系统采用780 nm近红外激光激发,这一波长具有多重优势:

低光毒性:相比可见光或紫外光,近红外光对活细胞的损伤极小,适合长时间活体成像

深层穿透:近红外光在生物组织中的穿透深度优于可见光,可对较厚样本进行成像

荧光兼容:780 nm激发波长不会干扰常见荧光染料的激发和发射,可与荧光成像无缝联用

自发荧光抑制:在近红外波段,生物样本的自发荧光显著减弱,信噪比更高

特征与好处

                       特征                                                                                                        好处

基于布里渊散射原理,通过检测布里渊频移获取力学信息                                                      无需荧光标记、无需物理接触,直接测量样本“软硬”

每个像素包含局部刚度或粘度信息                                                                                              获得真正的三维力学数据立方体,而非单点或表面数据

780 nm近红外激光激发                                                                                                              低光毒性、深层穿透、荧光兼容,适合长时间活体成像

集成式封闭盒系统,最高机械和热稳定性                                                                              隔绝环境干扰,数据重复性高

高光谱分辨率搭配最高探测器灵敏度                                                                                      捕获微弱布里渊信号,缩短采集时间

全自动系统设置和校准                                                                                                              无需光学背景即可操作,降低使用门槛

逐点扫描后获得3D数据立方体                                                                                              可对样本内部任意位置进行力学特性分析


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